延平郡王祠以奉祀鄭成功及其部將，始建於清康熙三十八年，是全台最早，也最著名的鄭成功祠。建築分為照壁、供奉鄭成功的正殿、崇祀太妃與寧靖王的後殿，以及東西廡。
庭園修築精美，厚重的琉璃綠瓦，襯著低矮的紅色牆身，配合祠外延平公園的池榭垂柳，整體風格莊嚴典雅，是台灣唯一福州式廟宇建築，祠內有康熙皇帝的題聯和各時期的題贊楹聯。
祠中收藏許多古文物，包括珍貴的沈葆禎手書。東西兩廡則陳列鄭氏部將牌位、儀仗等。後殿中央供奉鄭氏母親的牌位。庭中的兩棵古梅是鄭成功親手所植，已有300年歷史，每到寒冬吐露芬芳。祠堂右邊的台南民俗文物館，展示有民間的藝術品、古代生物標本及古代匾碑，館藏豐富。祠前右側保留著兩座銅製古炮及七座鐵製古炮。